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成分分析,配方還原,食品檢測,藥品檢測,化妝品檢測,環(huán)境檢測,性能檢測,耐熱性檢測,安全性能檢測,水質(zhì)檢測,氣體檢測,工業(yè)問題診斷,未知成分分析,塑料檢測,橡膠檢測,金屬元素檢測,礦石檢測,有毒有害檢測,土壤檢測,msds報告編寫等。

蛋白質(zhì)印跡定量分析檢測

發(fā)布時間:2025-07-10

關(guān)鍵詞:蛋白質(zhì)印跡定量分析測試案例,蛋白質(zhì)印跡定量分析測試機構(gòu),蛋白質(zhì)印跡定量分析測試方法

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來源:北京中科光析科學(xué)技術(shù)研究所

文章簡介:

蛋白質(zhì)印跡定量分析檢測用于精確測定特定蛋白在復(fù)雜樣本中的表達量。該技術(shù)通過電泳分離、膜轉(zhuǎn)移和特異性抗體反應(yīng)實現(xiàn)目標蛋白檢測,核心參數(shù)包括線性范圍、檢測限和批間精密度,適用于臨床診斷與基礎(chǔ)研究中的蛋白表達譜分析。
點擊咨詢

因業(yè)務(wù)調(diào)整,部分個人測試暫不接受委托,望見諒。

檢測項目

目標蛋白相對定量:采用內(nèi)參蛋白校正,定量精度達±5%,線性范圍10pg-1μg

灰度值分析:通過成像系統(tǒng)測量條帶光密度,分辨率0.01OD/mm2

分子量校準:使用預(yù)染蛋白Marker,誤差范圍±2kDa

表達豐度比:計算靶蛋白/內(nèi)參蛋白比值,重復(fù)性CV≤8%

跨膜效率驗證:轉(zhuǎn)印后Ponceau S染色評估,轉(zhuǎn)移率≥95%

非特異性結(jié)合率:封閉后背景信號控制,信噪比≥10:1

抗體效價測試:確定最佳一抗稀釋度(1:500-1:5000)

化學(xué)發(fā)光動力學(xué):ECL底物發(fā)光強度監(jiān)測,動態(tài)范圍104倍

條帶線性回歸:校準曲線R2值≥0.98

批次間差異分析:三批次樣本RSD≤12%

膜上蛋白回收率:Bradford法測定,回收率85%-115%

磷酸化位點定量:磷酸化抗體檢測,特異性驗證≥90%

檢測范圍

血清生物標志物:心肌肌鈣蛋白I定量檢測,檢測限0.1ng/mL

腫瘤組織裂解液:HER2受體表達水平分析,樣本量≥20mg

細胞信號通路蛋白:MAPK/AKT通路磷酸化狀態(tài)監(jiān)測

轉(zhuǎn)基因表達產(chǎn)物:重組蛋白在CHO細胞中的表達效率

病原體抗原檢測:病毒衣殼蛋白在感染組織中的分布

神經(jīng)退行標志物:腦脊液tau蛋白及Aβ42定量

藥物靶點表達:GPCR受體在膜蛋白組分的豐度

植物脅迫響應(yīng)蛋白:干旱誘導(dǎo)蛋白在葉綠體的表達

融合蛋白驗證:His-tag重組蛋白純度≥90%

凋亡相關(guān)因子:caspase-3活化片段檢測

細胞周期調(diào)控蛋白:Cyclin B1在同步化細胞的表達

表觀遺傳修飾:組蛋白乙?;稽c定量分析

檢測標準

ISO 19001:2018 免疫印跡定量分析通則

ISO 13485:2016 體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范

GB/T 35552-2017 蛋白質(zhì)免疫印跡檢測方法

ASTM E3106-17 印跡膜性能評估標準指南

GB/T 27417-2017 合格評定 化學(xué)分析方法驗證通則

YY/T 1579-2018 腫瘤個體化治療相關(guān)基因突變檢測試劑盒

CLSI EP05-A3 定量測量精密度驗證方案

GB 4789.40-2016 食品微生物學(xué)檢驗 蛋白質(zhì)免疫印跡法

IEC 61010-2-101 實驗室設(shè)備安全規(guī)范

ISO 15189:2022 醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力要求

檢測儀器

垂直電泳系統(tǒng):配置10-20孔梳齒,電壓范圍50-300V,實現(xiàn)蛋白按分子量精確分離

半干式轉(zhuǎn)印儀:恒流轉(zhuǎn)印裝置(0.8-3mA/cm2),支持PVDF/NC膜轉(zhuǎn)移

化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng):16bit冷CCD相機,檢測靈敏度0.5pg/band

微量分光光度計:紫外/可見雙光束掃描,樣品體積1μL定量

條帶分析軟件:自動背景扣除功能,支持分子量/灰度值同步分析

恒溫搖床:轉(zhuǎn)速50-500rpm可調(diào),溫控范圍4-50℃

膜封閉孵育箱:濕度控制±3%,溫度均勻性±0.5℃

自動洗膜機:八通道獨立控液,流速精度±5%

預(yù)染蛋白Marker:10-250kDa十二色熒光標記,抗轉(zhuǎn)移降解

化學(xué)發(fā)光底物自動分配器:加樣精度±1μL,避免底物氧化

檢測流程

1、咨詢:提品資料(說明書、規(guī)格書等)

2、確認檢測用途及項目要求

3、填寫檢測申請表(含公司信息及產(chǎn)品必要信息)

4、按要求寄送樣品(部分可上門取樣/檢測)

5、收到樣品,安排費用后進行樣品檢測

6、檢測出相關(guān)數(shù)據(jù),編寫報告草件,確認信息是否無誤

7、確認完畢后出具報告正式件

8、寄送報告原件

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