因業(yè)務(wù)調(diào)整，部分個(gè)人測試暫不接受委托，望見諒。

檢測項(xiàng)目

實(shí)時(shí)熒光PCR檢測：用于病毒核酸定量檢測，靈敏度達(dá)1copy/μL，循環(huán)閾值(Ct值)設(shè)定為≤40，擴(kuò)增目標(biāo)為B646L基因片段。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)：檢測血清抗體或抗原，OD值范圍0.1-3.0，臨界值計(jì)算基于陰性對照均值加三倍標(biāo)準(zhǔn)差。

病毒分離培養(yǎng)：在豬肺泡巨噬細(xì)胞(PAMs)中進(jìn)行，觀察細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)，培養(yǎng)周期5-7天，病毒滴度測定用TCID50法。

免疫組織化學(xué)(IHC)：分析組織切片抗原表達(dá)，使用特異性單克隆抗體，顯色反應(yīng)時(shí)間10分鐘，陽性信號強(qiáng)度分級為0-4+。

核酸序列分析：通過Sanger測序確認(rèn)病毒基因組，靶序列BP602R區(qū)域，比對相似度≥95%判定為陽性。

血吸附試驗(yàn)(HA)：檢測紅細(xì)胞凝集活性，滴度≥1:8為陽性，使用0.5%豬紅細(xì)胞懸液。

快速免疫層析試紙：野外篩查應(yīng)用，檢測限10^4病毒粒子/mL，結(jié)果讀取時(shí)間15分鐘，顯色帶強(qiáng)度判讀標(biāo)準(zhǔn)。

環(huán)境樣本PCR：檢測土壤或水體污染，DNA提取效率≥80%，內(nèi)控基因β-actin用于質(zhì)控。

血清中和試驗(yàn)：評估抗體中和能力，稀釋度1:16起測，中和指數(shù)計(jì)算方法。

病理組織學(xué)檢查：顯微鏡觀察脾臟壞死灶，H&E染色切片，病灶面積百分比≥20%判為陽性。

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析：檢測病毒脂質(zhì)標(biāo)志物，保留時(shí)間誤差±0.1min，特征離子峰m/z 300定量。

電鏡病毒形態(tài)鑒定：負(fù)染色樣品，放大倍數(shù)50,000X，病毒粒徑測量范圍170-190nm。

檢測范圍

生豬組織樣本：包括脾臟、淋巴結(jié)和肝臟，用于病理和病毒分離檢測，確保標(biāo)本新鮮冷藏運(yùn)輸。

血液和血清樣品：采集EDTA抗凝血或離心血清，適用于PCR和ELISA抗體篩查。

飼料和飲水樣本：監(jiān)控潛在污染源，采樣量≥500g，檢測病毒殘留風(fēng)險(xiǎn)。

環(huán)境表面拭子：從養(yǎng)殖場欄舍、車輛表面采集，棉拭浸泡PBS緩沖液，樣本體積5mL。

肉及肉制品：進(jìn)出口檢疫重點(diǎn)，選擇肌肉或內(nèi)臟部位，評估熱處理后病毒滅活率。

野生動(dòng)物媒介：如野豬或蜱蟲樣本，監(jiān)測自然宿主傳播鏈，采樣地域覆蓋森林區(qū)。

運(yùn)輸工具消毒殘留：卡車輪胎或集裝箱表面，檢測消毒劑殺滅效果后殘留病毒。

精液和胚胎生物材料：人工授精安全檢測，冷凍保存樣本解凍后分析。

疫苗制品：滅活或弱毒疫苗的質(zhì)量控制，驗(yàn)證無活病毒污染。

消毒劑效能測試：評估次氯酸鈉或醛類消毒劑，接觸時(shí)間10分鐘后病毒滴度下降log值。

空氣懸浮顆粒物：使用空氣采樣器捕獲，檢測氣溶膠傳播風(fēng)險(xiǎn)，采樣流量20L/min。

廢水處理樣本：市政或農(nóng)場廢水，濃縮后檢測病毒載量，評估環(huán)境擴(kuò)散。

檢測標(biāo)準(zhǔn)

依據(jù)OIE陸生動(dòng)物手冊第3.9.1章非洲豬瘟病毒檢測規(guī)程，涵蓋診斷方法和報(bào)告要求。

ISO16140-5:2020微生物方法驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)，用于PCR和ELISA實(shí)驗(yàn)室間比對驗(yàn)證。

ISO17025實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可規(guī)范，確保檢測過程質(zhì)量管理與控制。

GB/T18648-2020動(dòng)物疫病診斷技術(shù)通則，規(guī)定樣本采集和保存條件。

GB/T35912-2018非洲豬瘟病毒實(shí)時(shí)熒光PCR檢測方法，限定引物序列和反應(yīng)參數(shù)。

GB/T36894-2018血清學(xué)試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，包括ELISA板包被抗原純度要求。

ISO15216-1食品微生物檢測指南，適用于肉制品病毒篩查。

GB/T19915.3-2005動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)范，定義BSL-3級操作要求。

ISO7218微生物學(xué)通用規(guī)則，涉及培養(yǎng)基和試劑質(zhì)量控制。

ASTM F3350-21環(huán)境表面采樣標(biāo)準(zhǔn)，指導(dǎo)拭子采集和處理協(xié)議。

OIE水生動(dòng)物手冊相關(guān)章節(jié)，擴(kuò)展至水生環(huán)境樣本檢測。

檢測儀器

實(shí)時(shí)熒光PCR儀：基于TaqMan探針技術(shù)，支持96孔板高通量檢測，功能包括病毒DNA擴(kuò)增和Ct值實(shí)時(shí)分析。

酶標(biāo)儀：光度計(jì)讀取ELISA板吸光度，波長范圍450nm±10nm，功能為自動(dòng)計(jì)算OD值和臨界比。

生物安全柜：Class II型垂直層流設(shè)計(jì)，氣流速度0.5m/s，功能為提供無菌環(huán)境處理感染樣本。

高速冷凍離心機(jī)：轉(zhuǎn)速達(dá)15,000rpm，溫度控制-20°C至40°C，功能為分離血清或濃縮病毒顆粒。

顯微鏡：配備熒光模塊和攝像系統(tǒng)，放大倍數(shù)400X-1000X，功能為觀察組織切片抗原定位。

核酸提取儀：磁珠法自動(dòng)純化DNA，處理通量48樣本/批，功能為高效提取病毒核酸減少污染。

電鏡系統(tǒng)：透視電子顯微鏡，分辨率0.1nm，功能為直接觀察病毒形態(tài)和結(jié)構(gòu)特征。

恒溫培養(yǎng)箱：溫度精度±0.5°C，范圍25°C-40°C，功能為維持細(xì)胞培養(yǎng)病毒分離所需條件。

超低溫冰箱：儲(chǔ)存溫度-80°C，容量500L，功能為長期保存樣本和試劑保證穩(wěn)定性。

自動(dòng)化移液平臺：多通道移液器集成，精度±1μL，功能為標(biāo)準(zhǔn)化試劑添加減少人為誤差。

檢測流程

1、咨詢：提品資料(說明書、規(guī)格書等)

2、確認(rèn)檢測用途及項(xiàng)目要求

3、填寫檢測申請表(含公司信息及產(chǎn)品必要信息)

4、按要求寄送樣品(部分可上門取樣/檢測)

5、收到樣品，安排費(fèi)用后進(jìn)行樣品檢測

6、檢測出相關(guān)數(shù)據(jù)，編寫報(bào)告草件，確認(rèn)信息是否無誤

7、確認(rèn)完畢后出具報(bào)告正式件

8、寄送報(bào)告原件